多数微生物碱性蛋白酶不耐热，碱土金属，特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用 碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一，在丝绸、制革工业中也有广泛用途   

热稳定性 将酶液分别置于不同的温度条件下（30℃，40℃，50℃，60℃，70℃）保温 10min 后，立即在 0℃冰浴中冷却，然后在 40℃下测碱性蛋白酶活力，以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。测量三个重复求平均值，将**高的酶活力定义为 100%，分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与**高酶活性的比值。  

以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以 

缓冲液的PH＝pI值＋1，上阴离子柱，＝pI值－1，上阳离子柱，一般缓冲液ph范围在6.5～8.5之间，与PI值相差1个PH是比较理想的。 

如果不清楚PI值，可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里，然后分别试阳离子和阴离子填料（50ul左右得体积就够了），看那个PH下挂得好。 

强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定，所以他的优点是不同pH下载量恒定，可控性好，平衡过程快速、简单。 

弱离子交换介质的缺点：适用的pH范围比较小，随着pH不同载量发生变化。但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。因此强/弱离子交换介质都可以使用 

弱离子交换介质（DEAE、ANX、CM)优点在于：和强离子交换介质的选择性不同，因此我们一般先使用强离子交换，如果优化条件还是达不到理想的分离效果，可以尝试弱离子交换，用选择性不同的介质尝试一下。 

因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同，可以说是对不同蛋白的结合力有差异。S  

技术规格 离子交换剂类型 

Q Sepharose FF                    季氨基，强阴离子 DEAE Sepharose FF              二乙基氨基乙基，弱阴离子 ANX Sepharose 4FF              二乙基氨基丙基，弱阴离子 SP Sepharose FF                    磺丙基，强阳离子 CM Sepharose FF                    羟甲基，弱阳离子 离子容量 

Q Sepharose FF                0.18-0.25mmol（Cl-）/ml DEAE Sepharose FF               0.11-0.16mmol（Cl-）/ml ANX Sepharose 4 FF               0.13-0.18mmol（Cl-）/ml SP Sepharose FF                0.18-0.25mmol（H+）/ml CM Sepharose FF                 0.09-0.13mmol（H+）/ml 动态载量 

Q Sepharose FF                    120mg HSA/ml 填料 DEAE Sepharose FF                 110mg HSA/ml 填料 ANX Sepharose 4 FF              5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料 SP Sepharose FF                  70mg RNAase/ml 填料 CM Sepharose FF                  50mg RNAase/ml 填料 

压力/流速 

Q Sepharose FF     400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm DEAE Sepharose FF    300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm ANX Sepharose 4 FF   **少200cm/h，100kpa，XK50/60层析柱，柱床高25cm  SP Sepharose FF     400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm CM Sepharose FF     300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm  

平均颗粒大小                     90um（45-165um）   基质 

Sepharose FF                    高度交联琼脂糖，6% Sepharose 4 FF                  高度交联琼脂糖，4%   

PH稳定性 

Q Sepharose FF                1-14（短期），2-12（长期） DEAE Sepharose FF              1-14（短期），2-13（长期） ANX Sepharose 4 FF              2-14（短期），3-13（长期） SP Sepharose FF               3-14（短期），4-13（长期） CM Sepharose FF                2-14（短期），4-13（长期）   

化学稳定性                        

在所有常用的水溶液缓冲液中稳定：8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸 20%乙醇（Q , DEAE,ANX,CM ）,含0.2M醋酸钠的20%乙醇（SP）  

保存                  

保存温度                        4℃-30℃ l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用 

  

Phenyl-Sepharose HP 产品名称：苯基-琼脂糖凝胶 6FF 性    状：白色微球 凝胶类型：疏水层析介质 粒    径： 45-165µm 工作PH值：3-13 

应    用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等 产品名称：苯基-琼脂糖凝胶 H.P. 性    状：白色微球 凝胶类型：疏水层析填料 粒    径： 24-44µm 工作PH值：3-13